标记突变体实现斑马鱼仅凭视觉观察的快速非侵入性基因分型
Marked Mutants Allow for Rapid Non-Invasive Genotyping of Zebrafish by Visual Inspection Alone
该预印本在斑马鱼中利用CRISPR敲入策略，将包含启动子、荧光蛋白和polyA的完整次级标记盒插入目标基因编码外显子，使靶基因功能被破坏的同时永久标记突变等位基因，称为“标记突变体”。研究针对mitfa、tdp43和tdpl构建8个独立等位基因，使用孵化腺、胰腺或松果体启动子驱动GFP/RFP/BFP，发现生殖系传递效率约30%，所有等位基因均表现功能缺失；组合四个不同荧光标记可在表型出现前仅凭视觉识别tdp43/tdpl双复合杂合胚胎。该方法可减少PCR和剪鳍，简化群体管理并促进组合遗传学。
推荐理由：方法学新颖，对斑马鱼反向遗传学和动物模型管理有实用价值；但与人类生殖医学/ART核心问题距离较远，主要适合从事动物模型与发育遗传学的研究者浏览。